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Transformation

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작성일17-12-07 10:55

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형질전환 실험에 의하여 유전자의 본체가 DNA라는 것이 밝혀졌다.
이후 1972년 Cohen 등은 CaCl2로 처리한 E.coli Cell 이 Naked Linear DNA 뿐만 아니라 plasmid 도 Transformation 할수 있다는 사실을 알아냈다. 이러한 Restriction System의 Mechanism은 아직까지 완전히 이해되지 못하고 있지만, 한가지 분명한 것은 Restriction System은 외부 DNA를 인식하여 이를 분해하는 기능을 한다는 것이다. 이것은 S형 세균의 DAN 가 R형 세균 속에 들어가서 유전자 발현을 하기 때문이다.
현대의 Genetic Engineering 적 관점에서의 Transformation, 즉 Recombinational DNA의 인공적인 Transformation은 1970년 이전까지는 성공하지 못하였…(생략(省略)) 으나 Mandel과 Higa는 1970년 CaCl2로 처리한 E.coli Cell 이 Bacteriophage λ 로부터 추출한 DNA를 Uptake 한다는 사실을 알아냄으로써 인공적인 Transformation의 가능성을 시사하였다. Transformation , Transformation공학기술레포트 ,

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Transformation에 대한 data(資料)입니다. 그러나 고등생물에 있어서도 세균류에서 볼 수 있는 것 같은 형질전환 이 일어나는지 어떤지는 아직 밝혀지지 않았다. 전환을 일으키는데 필요한 DNA의 최소량은 약 10만분의 1 mol이며, DNA의 싱글스트랜드를 주는 것보다도 더블스 트랜드를 주는 쪽이 전환을 일으키기 쉽다.
형질전환은 외부로부터 주어진 DNA에 의하여 생물의 유전적인 성질이 변하는 일을 말한다.


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Transformation에 대한 자료입니다.


유전자 재조합

수십 년에 걸친, 유전학, 생화학, 세포생물학, 물리학의 진보로
Transformation

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다. 그러나 이러한 조건들이 항상 요구되는 것은 아니며 여러가지 다른 Factor들, 즉 Calcium 이외의 다른 Metal Ion 등의 존재도 Transformation을 촉진한다고 알려져 왔다.
이러한 이유 때문에 보통 E.Coli 중 Restriction-Deficient Strain이 Transformation을 가능케 하는 Host로써 널리 사용되고 있다
E.Coli Transformation은 Bacterial Cloning Step 중 가장 중요한 Step이기 때문에 가능하면 효율적이어야 한다. 여러 연구자들은 Transformation의 효율성에 미치는 여러가지 영향들을 연구하고 있다
이 결과로써 E.coli 와 Plasmid 는 Ca++ Ion과 저온 (0 - 5°C), 그리고 Heat Shock (37 - 45°C) 가 있는 환경에서 상호보완적으로 작용되어 Transformation Efficiency가 높아짐이 알려져 왔다.


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● Transformation 의 槪念
Transformation 은 유전자가 삽입된 vector (recombinant DNA) 를 bacteria 세포 내 로 주입하는 과정, 즉 DNA 를 세포에 주입하는 것입니다.
Transformation이라 함은 외부 DNA 가 Cell 내부로 주입되어 Cell의 Chromosome에 합쳐져서 Replication됨으로써 외부 Gene의 유전형질이 발현되어 특정한 Cell의 유전형질이 변화되는 현상을 말한다. 형질전환은 1928년 영국의 F.그리피스가 폐렴쌍구균(肺炎雙球菌)을 이용하여 실시한 실험이 계기가 되어 발견되었다.
이러한 Transformation 현상은 Griffith의 pneumoccoci 를 이용한 실험에서 처음으로 관찰되었으며 Avery, Macleod, Maclyn 등은 Transformation을 일으키는 물질, 즉 Genetic Information의 Carrier가 DNA임을 실증하였다.
이러한 Trasformation 현상은 Bacteria들이 가지고 있는 Restriction System, 즉 외부 유전자의 도입을 억제하는 기작에 의해 그 효율성이 결정된다된다. 다당류로 이루어진 두꺼운 막, 즉 협막(莢膜)을 가진 S형균으로부터 DNA를 추출하여 이것을 다당류성 협막을 가지지 않은 R형균에 작용시키면 R형균의 일부가 S형균으로 변한다.

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